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轉:加速推進反芻動物酶制劑產品應用技術體系建設

發布時間:2021-08-27   瀏覽次數:980次

 文:夏旻灝   董濤   左建軍   馮定遠

          2019年11月14日于北京召開的第三屆飼料酶制劑科技與產業發展大會,來自內蒙古牧業科學院研究員盧德勛先生基于酶制劑在飼料工業和養殖業中的應用現狀,結合反芻動物生理特性,提出了反芻動物酶制劑產品的應用技術體系組成和反芻動物酶制劑產品飼用技術“體系”作戰模式等兩個核心概念。

        盧德勛先生于2005年首次提出“飼料營養活性物質組學”理論,近來又對其相關理論進行深度思考和解析,這一理論是立足于系統生物學中間發展起來的“組學”的概念,采用高通量的組學技術研究飼料或日糧內營養活性物質功效因子和主效因子組對動物健康和生產性能影響的前沿科學理論。這一理論和技術對酶制劑產品研發和應用有重要指導作用。而酶制劑類型、飼料組成、日糧營養水平這三方面的關系變化使酶制劑的應有有著較高的可行性和必要性:

        一是科學合理的酶組成(如某些特殊的單酶、復合酶、組合酶、配合酶)

        二是復雜難以為瘤胃微生物消化的飼料成分(高纖維、高淀粉日糧)

        三是高營養水平的日糧(特別是高產奶牛富營養化的配方設計,超過了瘤胃微生物和消化道后段內源酶消化的能力)

        可見反芻動物酶制劑產品需解決下述三大問題:1、日糧成分的復雜性。2、酶制劑的抗逆性。3、效果評價的特殊性。

        另,當反芻動物酶制劑產品的應用技術體系面對生產實際需留意以下六點:

        1、外源酶與瘤胃微生物的菌酶協同互作 

        2、外源酶與微生物酶、宿主動物消化道酶的關系 

        3、外源酶應充分考慮反芻動物反芻行為 

        4、外源酶應用模式分段:瘤胃功能建立前后 

        5、外源酶應盡量避免導致反芻動物消化道代謝功能紊亂 

        6、關鍵在于復合酶的提升,要應用組合酶和配合酶,特別是配合酶

        反芻動物酶制劑產品應用技術體系主要包括以下三個核心:1、飼料組合酶和配合酶制劑產品設計技術。2、酶制劑產品活性與抗逆性及功能評價技術。3、酶制劑產品飼用技術體系。

        在飼料組合酶和配合酶制劑產品設計技術中,需要建立反芻動物的組合酶和配合酶的產品設計理念,其中最為核心的設計原則為:1、針對不同飼料種類或基礎日糧組成,設計特異性的組合酶制劑,使這種酶制劑的組成能符合特定干草、目標底物的成熟程度以及結構性障礙。2、根據不同的飼料加工方法、酶制劑投放方法和動物采食量高低設計相應的酶制劑產品。3、根據酶的來源優化組合酶制劑內酶的種類和活性。

        在酶制劑產品活性與抗逆性及功能評價技術中,抗逆性評價主要為以下三方面:1、使用瘤胃瘺管技術評價酶在瘤胃內微生物對酶活的影響。2、pH變化對酶活的影響。3、在模擬條件下主要金屬離子濃度對酶活的影響以及瘤胃溫度與酶最適溫度的差異。更需結合包括瘤胃綜合指標(微生物(重要微生物的數量與活性)、微生態(各類微生物比例)、理化指標(如pH值、過瘤胃速度)、發酵類型與產物(如揮發性脂肪酸比例))和健康與有效利用指標(酸中毒發生程度、其他代謝病比例、有效利用年限統計)等進行全面評價。

        酶制劑產品飼用技術體系主要有以下三方面:1、在組學型酶制劑產品研制過程中要根據動物不同生理階段、不同飼養決策目標和環境因素設計針對性產品,使其系列化。2、在日糧優化設計過程中要針對不同飼料原料的特點和日糧類型,盡可能做到日糧內基本營養成分與營養活性物質成分優化組合。3、在融入動物營養工程技術體系,進行‘體系’作戰時,利用營養工程技術的‘導彈智能化’動態優化功能達到精準營養效果。

        反芻動物酶制劑產品飼用技術“體系”作戰模式主要分為以下兩種:

        1、利用酶制劑產品直接處理混合粗飼料模式( P+3M技術體系 )。 

        2、在日糧設計時將酶制劑產品添加到日糧或精補料內模式(通用營養工程技術體系)。其核心為以下三點:1、在進行日糧優化設計時,根據動物種類、生理階段、日糧組成和飼養決策目標選用相應的組學性酶制劑產品確定添加劑量,優化日糧營養素平衡。2、將優化設計確定的牛羊日糧與具有營養調控功能的營養管理技術結合起來,制定新的飼養方案。3、根據生產效果和營養檢測結果,調整所制定的飼養方案。


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2021.08
轉載:酶制劑,只做好事不留名

轉自:原創 上海市食品學會 食品與生活

 谷物發酵后能釀出醉人的美酒,烘焙出的面包松軟又美味,菠蘿咕咾肉中的肉粒格外嫩滑,一口平淡無奇的饅頭在唇齒間會滋生出淡淡的甜味……食物經歷的這些神奇變化,都要歸功于食品中各種各樣的酶。生活中的這些常識和小“神奇”被食品科學家解密,制成了食品用酶制劑,應用于食品工業,造福我們的味蕾。

我叫酶制劑 只做好事不留名

 用于食品的酶制劑是一種食品添加劑,在食物中只起到催化劑的作用,幫助食品中一種物質完成轉變,而一旦完成使命,就默默隱退,香消玉殞,在最終產品中消失或失去活性。也有一小部分酶制劑會繼續發光、發熱,在最終食品中發揮食品添加劑的功能,如溶菌酶,可以作為防腐劑用于食品中。

 食品用酶制劑可以從確保食品安全的動物或植物中提取,也可以由通過安全審核的微生物經發酵、提取制得。一般情況下,食品用酶制劑是含有一種或若干種活性成分的混合物。

這些美味里有我的貢獻

 食品安全國家標準《食品添加劑使用標準》(GB 2760-2014)(以下簡稱“使用標準”)批準使用的酶制劑可應用于焙烤、啤酒、乳制品、果蔬汁、植物提取、蛋白水解、油脂加工和淀粉糖加工等各種食品生產的多個環節。例如,在制作烘焙美食的過程中,淀粉酶通過降解小麥面粉中的淀粉,產生低分子量的糖和糊精,提高了酵母的發酵效率,延緩了烘焙食品的老化時間,改善了焙烤產品的持水能力,使其保持柔軟和彈性。在啤酒生產中有一味重要的原料——麥芽,其中天然含有高活力的淀粉酶,能使谷物淀粉轉化為可溶性的糖類。啤酒生產中使用蛋白酶能夠使啤酒清澈透明。提起蛋白酶,大家最熟悉的莫過于嫩肉粉,它能使肉絲或肉片柔嫩,老太太也咬得動。在牛奶中添加乳糖酶降解乳糖,能使乳糖不耐的人群也能喝牛奶,不會產生不適感。

即使美味72變 也要接受“緊箍咒”的約束

 酶制劑是一個統稱,食品用酶制劑是經過食品安全評估的一部分,在使用標準中對食品用酶制劑的具體品種及其來源名單有詳細說明。若要新增品種,需要按照新的酶制劑的審批程序進行申報,經批準列入該名單后才能使用。在使用標準中,食品用酶制劑被列為食品工業用加工助劑范疇,在達到預期目的的前提下應盡可能地降低使用量。因為酶主要由蛋白質構成,經加工失活后是非常安全的,不用擔心食品安全問題。  

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2021.08
轉:酶制劑在水產飼料中的應用及研究進展

出處:《飼料工業》 作者:柴仙琦等 水產養殖網

柴仙琦 冷向軍 張 民 劉國鋒 唐 鵬
摘 要:隨著養殖業的發展,對飼料行業的要求也越來越高,飼料資源呈現出緊缺的趨勢。飼用酶制劑作為高效,安全,環保添加劑在飼料行業中的應用也越來越重要。本文綜述了飼用酶制劑的分類、作用機理、現階段存在的問題,并展望了飼用酶制劑在水產飼料中的應用前景,為以后飼用酶制劑的研究做參考。
養殖業的發展對飼料行業提出了更高的要求,飼料資源也呈現出日益緊缺的趨勢。一方面,如何開發新的飼料資源;另一方面,如何提高現有資源的利用率,是飼料行業所面臨的重大問題。利用發酵工程和基因工程等生物技術手段研發出的酶制劑,能夠提高飼料的利用率,在一定程度上緩解飼料資源緊缺的狀況。近年來,生物技術的發展帶動著酶制劑快速發展。飼用酶制劑是從生物中提取的具有酶特性的一類物質,主要是從動物、植物、微生物中提取,其中微生物提取酶制劑較為廣泛。酶制劑具有高效、安全、環保等特點,在飼料工業中受到越來越多的重視。
1· 酶制劑的種類和作用效果
飼用酶制劑的種類多樣。按照動物自身能否合成來分類,可分為消化酶和非消化酶[1]。其中,消化酶包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等,動物體內能夠合成這類酶,但因某種原因需要強化和補充。非消化酶包括植酸酶、木聚糖酶等,動物自身不能合成,這類酶大多來源于微生物,能消化動物自身不能消化的物質或降解一些抗營養因子。按照酶制劑的類型來分,可分為單一酶制劑和復合酶制劑。單一酶制劑如淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶、纖維素酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶和植酸酶等。復合酶制劑由一種或幾種單一酶制劑為主體,加上其他單一酶制劑混合而成,或者由一種或幾種微生物發酵獲得。
1.1 單一酶制劑
1.1.1 植酸酶
植酸酶是催化植酸及植酸鹽水解成肌醇與磷酸(或磷酸鹽)的一類酶的總稱。植酸酶可提高動物對植酸磷的利用率,降低磷的排泄。寶石鱸飼料中添加1 000 UFA/kg植酸酶對魚體消化酶有增強作用,對磷的保留率增大,排放率減少[2]。牛紀鋒等[3]在大口黑鱸配合飼料中添加1 000 U/kg植酸酶,能有效提高大口黑鱸對蛋白質、干物質、植酸磷和總磷的利用率。在花鱸飼料中添加中性植酸酶,提高了飼料中磷的利用率,減少磷排放量[4]。飼料中植酸酶的添加可減少飼料中磷的添加量,降低飼料成本,提高飼料中磷的利用率,提高增重率[5]。在牙鲆飼料中直接添加植酸酶,顯著提高了牙鲆的特定生長率(P<0.01)、氮貯積率(P<0.05)、磷貯積率(P<0.01), 降低了氮排放率(P<0.05)和磷排放率(P<0.01), 但飼料效率和蛋白質效率沒有顯著變化(P>0.05),而添加用植酸酶預處理的豆粕,降低了植酸含量,提高牙鲆特定生長率、飼料效率、蛋白質效率和氮貯積率,顯著降低了氮、磷和鈣的排放量[6]。此外,在尼羅羅非魚[7]、異育銀鯽[8]、青魚[9]、斑點叉尾鮰[10]、鯉魚[11]等飼料中均有關于植酸酶的研究應用的報道。針對動物體消化系統的特異性,植酸酶有酸性植酸酶和中性植酸酶兩種。酸性植酸酶主要作用于畜禽類和有胃水產動物,而對于無胃或是消化道偏中性的水產動物則用中性植酸酶。所以針對不同的養殖對象采用相應的植酸酶。
1.1.2 非淀粉多糖酶
非淀粉多糖包括阿拉伯木聚糖、β-葡聚糖、甘露聚糖、果膠、纖維素、幾丁質和木聚糖等[12]。非淀粉多糖是存在于植物性飼料中的主要抗營養因子,不被消化酶所降解,遇水形成膠態溶液,使食糜黏度增大,阻礙營養物質的消化吸收。非淀粉多糖在非淀粉多糖酶的作用下大部分被水解, 腸道中黏度隨之下降,抗營養作用也相應降低。在奧尼羅非魚[13]飼料中添加0.02%和0.04%的非淀粉多糖酶會顯著提高魚體特定生長率,降低餌料系數(P<0.05)。陳京華(2009)[14]在對牙鲆的研究中發現,在豆粕替代45%魚粉的飼料中添加0.2%非淀粉多糖酶,魚體特定生長率、飼料效率與全魚粉組均無顯著差異(P>0.05);同時,添加0.2%非淀粉多糖酶組較不添加非淀粉多糖酶組的肝、腸的消化酶活性有顯著升高(P<0.05)。飼料中添加非淀粉多糖酶對大黃魚特定生長率和胃、腸道淀粉酶活性均有顯著提高(P<0.05)[15]。
1.1.3 蛋白酶
蛋白酶可促進動物體對蛋白質的消化。在奧尼羅非魚飼料中添加0.1%金屬蛋白酶能顯著提高羅非魚的生長性能和血清SOD活力[16]。在鯉魚飼料中添加蛋白酶AG 175 mg/kg增加了腸道消化酶活性,低魚粉飼料中添加蛋白酶有助于改善鯉魚生長性能和提高腸道食糜蛋白酶活力[17-18]。在正常魚粉含量的凡納濱對蝦飼料中添加蛋白酶AG 175 mg/kg,對增重率沒有顯著的提高,但在低魚粉組中添加蛋白酶,則顯著提高了蝦體增重率(P<0.05)[19]。譚崇桂等(2013)在魚粉含量為23%的凡納濱對蝦飼料中添加蛋白酶PT 175 mg/kg;提高了蝦體增重率11.25%(P<0.05),降低飼料系數0.09(P<0.05)[20]。在魚粉含量為28%的虹鱒飼料中添加蛋白酶PT 175 mg/kg,提高了魚體增重率9.42%,降低了飼料系數7.8%;同時,增加胃與腸的蛋白酶活性及腸道皺襞高度和面積[21]。蜘蛛酶是蜘蛛消化道內的共生微生物所分泌的一種高活性的金屬蛋白酶,在凡納濱對蝦飼料中添加0.10%、0.15%蜘蛛酶,成活率可分別提高8.34%、7.34%(P<0.05),飼料系數分別降低0.05、0.17(P<0.05)[22]。在青魚[23]飼料中添加0.1%中性蛋白酶(8 000 U/g),提高魚體增重率;添加0.2%、0.3%中性蛋白酶,提高了攝食量和蛋白質消化率,但對干物質消化率和消化酶活性沒有顯著影響。蛋白酶的使用一定要與基礎配方相適應,必要時考慮其他酶制劑的綜合應用能取得更好的作用效果。
1.1.4 脂肪酶
在飼料中增加脂肪的含量,會產生對蛋白質的節約效應,提高蛋白質效率,促進動物生長[24-25]。脂肪酶功能是將脂肪水解為甘油一酯、甘油二酯和游離脂肪酸,是動物體內的一種重要消化酶。目前對脂肪酶的研究還不多,因其多樣性和穩定性較差、底物不溶于水、生產成本較高等原因,有關脂肪酶在水產飼料中的研究很少。谷金皇等[26]在瓦氏黃顙魚飼料中添加300 mg/kg 的脂肪酶,提高了魚體增重率 9.29%(P<0.05),降低了飼料系數6.35%(P<0.05)。在南方鲇魚飼料中添加100 mg/kg和300 mg/kg脂肪酶,增重率也提高了4.0%和5.8%,飼料系數降低了5.0%和6.6%;同時增加了粗脂肪的消化率和蛋白質效率(P<0.05)[27]。
1.1.5 淀粉酶
淀粉酶的主要作用是促進淀粉的分解消化,與內源淀粉酶相互協同。飼料中添加淀粉酶后提高了腸道中淀粉酶的活性,淀粉酶活性的提高是外源酶和內源酶的疊加效應[28]。黃燕華等(2009)[29]在凡納濱對蝦飼料中添加150 mg/kg的淀粉酶,對增重率、特定生長率、餌料系數均無顯著影響(P>0.05)。總體來看,單一淀粉酶在水產飼料上的應用報道很少,通常是作為復合酶制劑的一種成分而應用。
1.2 復合酶制劑
在飼料中添加一定比例的復合酶制劑,能有效改善動物對飼料中的纖維素、半纖維素、果膠等植物細胞壁材料的消化和吸收,改善對蛋白質和淀粉等的利用,從而提高動物的增重和飼料利用率。鐘國防等(2012)在飼料中添加0.05%和0.075%的復合酶制劑(淀粉酶、纖維素分解酶、蛋白酶為主),提高了暗紋東方鲀的干物質和蛋白質表觀消化率(P<0.05)[30];在尼羅羅非魚飼料中添加0.10%、0.15%復合酶制劑(包括淀粉酶、纖維素分解酶、蛋白酶),提高了魚體增重率和蛋白質效率,降低了飼料系數(P<0.05),肝胰臟的SOD、LSZ活性也有顯著提高(P<0.05)[31]。周金敏等(2012)在粗蛋白含量30%和28.5%的草魚幼魚飼料中分別添加復合酶制劑100~300 g/(t以蛋白酶、木聚糖酶、纖維素酶為主),提高了飼料效率和特定生長率[32]。王紀亭等[33]將木聚糖酶、β-葡聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶為主的復合酶制劑添加到草魚飼料中,顯著提高了草魚增重率和干物質、粗蛋白質、粗脂肪及粗纖維的表觀消化率(P<0.05),并提高了白細胞吞噬活性和血清殺菌能力(P<0.01)。張滿隆等(2002)[34]、王輔臣等(2011)[35]、周金敏等(2010)[36]等關于草魚飼料中補充復合酶制劑的研究中均表明復合酶能促進草魚生長,降低飼料系數。在異育銀鯽[37-38]、彭澤鯽[39]、黃顙魚[40]中均有類似報道。
2 ·酶制劑的作用機理
酶可以消化原來受細胞壁結構包裹的營養物質,增加飼料中多聚糖、油脂和蛋白質等的利用率。其次,酶制劑可以降解影響營養物質消化、吸收和利用的抗營養因子,主要降解谷物細胞壁中的碳水化合物部分,如不能被消化酶消化的β-葡聚糖和阿拉伯木聚糖。在幼齡動物中應用酶制劑,主要是彌補其自身消化酶分泌的不足[41]。
2.1 消除抗營養因子
麥類飼料中含有大量的可溶性非淀粉多糖,進入消化道后會產生黏性,使消化液不易接觸飼料,降低飼料消化利用率。若添加一些非淀粉多糖酶,如β-葡聚糖酶、木聚糖酶、纖維素酶等,則可分解非淀粉多糖,減小黏性。酶制劑還可破壞植物細胞壁,消除蛋白類抗營養因子,如胰蛋白酶抑制劑和植物凝集素等。植酸酶還可消除植酸的抗營養作用。Rodehutscord等[42]認為,在磷的需求被滿足之前魚體吸收的所有磷都會在體內累積,不會影響可溶性磷的排泄,植酸酶加入后可提高對飼料原料中磷的利用率,增加飼料中磷的可利用性。張春曉等(2008)[43]在大黃魚飼料中添加非淀粉多糖酶復合酶制劑,顯著降低了魚體氨氮排泄率(P<0.05),添加植酸酶則增加了可溶性磷的排泄率。非淀粉多糖酶作用于相應底物,使食糜黏度降低,減少養分擴散的阻礙作用,從而提高了養分的消化率和吸收率。
2.2 對腸道消化酶和結構的作用
酶制劑對消化器官和消化道的酶活也有影響。飼料中添加非淀粉多糖酶,可使奧尼羅非魚肝胰臟、胃、腸道蛋白酶活性升高[44];日糧中添加以葡聚糖酶為主的外源酶后, 異育銀鯽中腸食糜及組織中蛋白酶、淀粉酶活性均顯著提高(P<0.05)[45]。消化酶活性的增加促進了魚類對營養物質的分解和消化吸收,從而加速其生長。
2.3 提高免疫功能
添加酶制劑改善了動物體生長性能,體質增強,其抗病能力也增強。飼料中添加金屬蛋白酶,在改善羅非魚生長的同時,血清SOD、溶菌酶活力也顯著上升[16]。
2.4 在飼料加工過程中的作用
傳統的觀點認為,酶在進入動物消化道后才開始發揮作用,但在生產中,一些酶制劑在調質、制粒、后熟化后,其活性已大部消失,但飼養試驗的效果卻不錯,這提醒我們,酶的作用不只局限在動物體內,而在飼料加工的系列過程中就開始發揮作用了。李玉珍等(2008)[46]研究表明,2709堿性蛋白酶在70 ℃預處理10 min,蛋白酶的水解作用得到極大提高。柴仙琦(2013)研究表明,飼料中添加蛋白酶PT,在制粒和熟化過程中,蛋白酶已經發揮了水解蛋白質的作用,蛋白酶經過制粒和后熟化過程后,酶活性仍能保留70%[47]。
綜上,在飼料中添加酶制劑,可消除抗營養因子,增加內源酶活力,對動物的生長、消化吸收、抗病免疫都有改善和增強作用。
3· 存在的問題及展望
酶制劑的生產屬于發酵工業,其主要用于生產工業酶制劑。存在的主要問題有:一是現有工業酶制劑的測定方法不能完全適用于飼用酶制劑,不同的企業有不同的測酶標準,在養殖業中很難確定一個統一的測定酶活性的方法,導致酶的特性難以確定,對酶的使用發揮不了最佳效果;二是飼用酶制劑在制粒加工過程中,高溫、高濕會對酶活性產生破壞,這對使用酶制劑產生很大限制,可通過制粒后噴涂添加的工藝予以解決,或選用耐高溫酶制劑。另外,酶制劑的使用一定要有針對性,動物的種類、年齡、生理階段、飼料組成均會影響酶制劑的作用效果。
今后,應該加大科技投入,綜合發酵、生物技術和飼料營養方面的特點和需求,研制出適合于飼料原料和市場特點的飼用酶制劑新產品,以推動飼用酶制劑的生產和廣泛應用;制訂適合飼用酶制劑檢測方法的標準,規范飼用酶制劑生物學評價試驗方法;開發耐高溫的酶制劑。在酶制劑的使用方面,要針對不同的飼料和對象,使用不同的酶制劑。如在消化系統還未發育健全的動物飼料中應使用消化性的酶制劑來補充酶的不足;在低黏度日糧中應使用木聚糖酶和果膠酶等;在高黏度日糧中應使用β-葡聚糖和木聚糖酶;高纖維日糧中應使用纖維素酶等。
 隨著社會的發展,對動物產品和飼料的安全性提出了越來越高的要求,酶制劑將成為養殖業和飼料工業中的不可缺少的內容而具有廣闊的應用前景。